Agkistrodon halys zehirinden elde edilen trombin benzeri Agapurin enziminin alt birimlerinin çözünürlüğü ve amino asit kalıntılarının dizilimi

[Özet] Amaç Agacutin'in iki benzer alt biriminin N-terminal 15 amino asit kalıntısını belirlemek.Enzim molekülünün iki alt biriminin, alt birim tek peptit zincirini elde etmek için bölünmesi ve dizilenmesi gerekir.Yöntemler Yüksek düzeyde saflaştırılmış Agacutin, biyokimyasal yöntemle elde edildi.Tanımlama ve dizileme için tek alt birim numuneleri, SDS-PAGE elektroforez ayırma, alt birim yapışkan şerit geri kazanımı ve PVDF membran elektrotransfer teknolojisi ile hazırlandı.Sonuncusu, Edman bozunma yöntemiyle alt birimin N-terminalinde 15 amino asit kalıntısı belirledi.Sonuçlar Büyük alt birim dizisi (16 kDa) DCSSGWSSYEEHQYY idi ve küçük alt birim dizisi (15 kDa) DSSGWSSYEGHEYYV idi.Sonuç Sekanslama sonuçları, NCBI veritabanını araştırarak Agacutin'in yeni bir yılan zehiri trombin benzeri enzim olduğunu gösterdi.